本文建立了高效液相色谱(荧光检测器FLD)测定水中联苯胺的高效分析方法。水样中的液相联苯胺被C18固相萃取柱吸附后用乙酸溶液将联苯胺保留在吸附柱内,用甲醇溶液淋洗去除杂质,再用氨水甲醇混合溶液进行洗脱,最后用氮吹仪浓缩定容,用液相色谱荧光检测器进行定量测定。在添加浓度为10.0ug/L和100.0ug/L的色谱条件下,加标回收率在94.1%~110%之间,相对标准偏差在2.38%~4.05%之间,方法检出限为0.004ug/L。本方法操作简便快捷,法测杂质引入少,应用范围广,地表水、地下水、定水生活污水和工业废水中的中联联苯胺均可用该方法测定。
联苯胺是苯胺印染、油漆、高效塑料等工业生产中的液相常用原材料,能严重危害人体健康,色谱可经呼吸道、法测皮肤等进入人体,定水对人体的中联血液系统、肝脏和神经系统等造成严重损伤。苯胺目前,高效联苯胺已被国际癌症研究机构列为第一类致癌物。水中联苯胺的分析方法国内外目前主要有分光光度法、荧光光度法、气相色谱法、气相色谱-质谱仪联用法、液相色谱法、液相色谱-质谱仪联用法等。分光光度法和荧光光度法只能测定总量,无法对单一组分进行定性和定量分析;气相色谱法和气相色谱-质谱仪联用法需用液液萃取等方式对水样进行浓缩富集后再测定,前处理时间较长且容易带入有机杂质的干扰,并且气相色谱-质谱仪联用法咋使用过程中产生的费用较高,相比较而言,液相色谱法前处理采用固相萃取法将富集和净化两个步骤同时进行,操作速度快,有机溶剂用量少,杂质干扰也少,更加符合实验室得要求。
本文利用C18固相萃取柱对水中联苯胺进行富集和净化,再用氨水甲醇混合溶液洗脱,定容后用高效液相色谱荧光检测器进行测定,前处理较简单,无需复杂操作且灵敏度高,检出限低,适合大部分实验室的需求。
甲醇中的联苯胺标准溶液(北京迪科马科技有限公司,浓度1004ug/m L)、乙腈(液相色谱纯,ASTOON CHEMICAL TECHNOLOGY.INC)、甲醇(液相色谱纯,ASTOON CHEMICAL TECHNOLOGY.INC)、冰醋酸(分析纯,西陇化工股份有限公司)、氨水(分析纯,广东光华科技股份有限公司)、固相萃取柱(Lab Tech C18小柱,1000mg/6ml)。
联苯胺中间溶液的配置:准确移取联苯胺标准溶液10.00ul于2ml的棕色安培瓶中,用甲醇定容至1.00ml,得到浓度为100.4mg/L的标准中间液,再准确移取联苯胺中间液100.0ml于2ml的棕色安培瓶中,用甲醇定容至1.00ml,得到浓度为1.004mg/L的标准使用液,备用。
高效液相色谱仪(安捷伦LC1260,具有荧光检测器(FLD))、自动进样器1260 ALS、色谱柱(HPLC C18毛细管色谱柱)、氮吹仪(Lab Tech)、超声波清洗仪器(KWS-1012F,深圳市科威信洗净科技有限公司)、微量注射器(10.0、50.0、100、1000ul)、一般实验室常用仪器和设备。
根据相关规定的要求进行样品采集。在采样前,向棕色样品瓶中加入硫代硫酸钠溶液(每500ml加入40mg)固定,采样时,水样应充满容器并溢出。采样后保证样品的p H值在6-9,若p H值不在6-9之间,用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节至6-9。样品采集后应在4℃冷藏,避光保存,5d内萃取,萃取液在4℃避光保存,4d内完成分析。
先用5ml甲醇以2ml/min的流速通过C18固相萃取柱,进行萃取柱活化,活化完成后,将150ml的水样以约2ml/min的流速通过已活化的固相萃取柱,待水中的联苯胺被萃取柱富集后,再依次用5ml乙酸和8ml甲醇溶液淋洗萃取柱以去除柱中残留的杂质,最后用7ml氨水-甲醇混合溶液将萃取柱中的联苯胺洗脱下来,洗脱液在60℃浓缩,定容至2ml,过0.45um滤膜后冷藏保存,待测。
用去离子水或蒸馏水代替样品,按照与样品一致的处理方法进行空白溶液的制备。
流动相为乙腈和水溶液;洗脱程序为等度淋洗;流动相比例为乙腈/水(v/v)=60/40;柱温40℃;流速为1.0ml/min;进样量为40.0ul;检测器波长为激发波长292nm,检测波长395nm;检测器为荧光检测器。
取适量的已配置好的联苯胺标准使用液,用甲醇溶液稀释,制备成浓度分别为5.00ug/L、10.0ug/L、20.0ug/L、50.0ug/L、100ug/L、200ug/L的标准曲线系列,备用。
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